冻干机
利用制备胶原蛋白海绵,可以解决现有方法制备的胶原蛋白海绵存在生产周期长、产率低、纯度低以及止血性能差的问题,而提供了高纯度胶原蛋白海绵。
高纯度胶原蛋白海绵的制备方法,按以下步骤进行:
一、新鲜的牛跟腱预处理
二、胶原蛋白的提取
三、离心:将提取液进行冷冻离心,离心机温度为-5~5°C,转速为10000~15000转/分,离心20~30min,取离心的上层清液;
四、盐析-->溶解;
五、梯度透析:①将溶解的胶原溶液装入截留分子量为五万的透析袋中,在磁力搅拌下首先用质量浓度为1.5%~3%的乙酸做透析外液,透析24h,12h后换一次透析外液;其次用质量浓度为0.3%~1.2%的乙酸做透析外液,透析24h,12h后换一次透析外液;最后用质量浓度为0.08%~0.2%的乙酸做透析外液,透析24h,12h换一次透析外液;
②将透析完的胶原溶液取出装入截留分子量为一万的透析袋中,在磁力搅拌下用蒸馏水做透析外液,每12h换一次蒸馏水,直至透析外液用硝酸银溶液检测没有沉淀产生为止,获得透析好的胶原溶液,整个透析过程都在室温下进行,透析外液的体积为内液的8~12倍;七、预冻:将透析好的胶原溶液注入不锈钢盘模具中,然后室温下静置脱泡5~IOh,再放入低温冰箱中采用程序降温,降温速度为10°C /H,从常温降温至-50°C~_80°C并预冻12~24h,获得预冻好的胶原溶液;
六、冷冻干燥:将预冻好的胶原溶液放入上海爱博体育TF-SFD-3中,真空干燥36~72h,获得冷冻干燥成型的高纯度胶原蛋白海绵;
七、灭菌:将冷冻干燥成型的高纯度胶原蛋白海绵装入铝箔袋中,用封口机封口,然后用6tlCo进行辐照灭菌,即完成高纯度胶原蛋白海绵的制备.
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