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爱博体育冻干机:微生物菌种如何真空冷冻干燥保存

添加时间:2017-11-21 10:28:33

来源:www.tfyqchina.cn

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爱博体育:微生物菌种如何真空冷冻干燥保存?步骤如下:

①准备安培管 

   用于真空冷冻菌种保藏的安培管宜采用中性玻璃制造,形状可用长颈球形底的,亦称泪滴型安培管。大小要求外径6~7.5mm,长105 mm,球部直径9~11 mm,壁厚0.6~1.2 mm,也可用没有球部的管状安培管。塞好棉塞,在压力0.11MPa,温度121℃条件下灭菌30min后备用。
②准备菌种 

   用真空冷冻干燥法保藏的菌种保藏期可长达几年甚至几十年,为了不出现差错,所用菌种纯度要高,而且菌龄要适宜。细菌和酵母菌的菌龄要求超过对数生长期,若用对数生长期的菌种进行保藏,其存活期反而降低。一般细菌的菌龄要求24~48h;酵母菌为3d;形成孢子的微生物则宜保藏孢子;放线菌和丝状真菌菌龄为7~10d。timg.jpg

③制备菌悬液与分装 

   以细菌斜面为例,用脱脂牛乳2mL左右加入试管中,制成浓菌液,每支安培管分装0.2mL。
④冷冻 

   微生物菌种用,上海爱博体育有成套的装置出售,可直接真空冷冻干燥(直接在冻干机内原位干燥,④和⑤步骤结合)。

   此处介绍的是简易的方法与装置,可达到同样的目的。
   将分装好的安培管放中冻结,无低温冰箱可用冷冻剂如干冰(固体CO2)酒精液或干冰丙酮液,温度可达-70℃。将安培管插入冷冻剂,只需冷冻几分钟,即可使悬液结冰。
⑤真空干燥 

   为在真空干燥时使样品保持冻结状态,需准备冷冻槽,槽内放碎冰和食盐,混合均匀,可冷至-15℃。安培瓶冷冻槽的干燥瓶内。

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⑥抽气 

   一般若在30min内能达到93.3Pa(0.7mmHg)真空度时,则干燥物不致溶化,以后继续抽气,几小时内,肉眼可观察到被干燥物以趋干燥,一般抽到真空度26.7Pa(0.2mmHg),保持压力6~7h即可。

⑦封口 

   抽真空干燥后,取出安培瓶,接在封口用的玻璃管上,可用L形五通管继续抽气,约10min即可达到26.7Pa(0.2mmHg)。于真空状态下,以煤气喷灯的细火焰在安培管颈中央进行封口。封口以后,保存于冰箱或室温暗处。
   此法为菌种保藏方法中最有效的方法之一,对一般生活爱博体育的微生物及其孢子都适用,即使对一些很难保存的致病菌,如脑膜炎球与淋病球菌等亦能保存。此法适用于菌种的长期保存,一般可保存数年至几十年。


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